TOCE™

Tecnologia para PCR multiplex em tempo real capaz de diferenciar múltiplos alvos e variantes genéticas em uma única reação.

TOCE™

PCR multiplex em tempo real com diferenciação simultânea de alvos

A tecnologia TOCE™ permite detecção simultânea de múltiplos alvos em um único canal fluorescente por meio da diferenciação de sinais baseada no Catcher-Tm™. O sistema mantém estabilidade analítica mesmo diante de variações de sequência, apresenta sensibilidade equivalente à PCR singleplex e possibilita análises quantitativas multiplex com cyclic-CMTA™, contribuindo para elevada eficiência na detecção multiplex em tempo real.
A tecnologia TOCE™ é uma solução química muito elegante para uma PCR em tempo real multiplex homogênea. TOCE™ supera as atuais limitações técnicas da PCR em tempo real por sonda de hibridização e explora a totalidade do potencial da PCR em tempo real em análises multiplex através de uma exclusiva geração de sinal e análise de temperatura de melting por novos componentes. A tecnologia TOCE™ permite detectar e diferenciar múltiplos alvos em um único tubo, além de fornecer resultados quantitativos através de análise cíclica da temperatura de melting do Catcher (cyclic-CMTA).

Princípios da tecnologia TOCE™

Os componentes chave da tecnologia TOCE™ são pares de primers DPO™, Pitcher™ e Catcher™. Os primers DPO™ promovem amplificação seletiva da sequência-alvo, enquanto o Pitcher™ reconhece a região amplificada. Após a clivagem mediada pela nuclease 5’, ocorre interação com o Catcher™, produzindo sinais fluorescentes distintos para cada alvo identificado. Os sinais podem ser analisados em tempo real ou por curva de melting.

Análises semiquantitativas com cyclic-CMTA™

O cyclic-CMTA™ utiliza pontos pré-selecionados da amplificação para avaliação da curva de melting e estimativa da concentração do alvo. A identificação dos picos de melting em diferentes ciclos permite correlacionar o perfil de detecção com a concentração da amostra, possibilitando análises semiquantitativas multiplex em PCR em tempo real.

Publicações técnicas

Seegene Bulletin | Volume 1 | Julho 2012

The Science and Business of Molecular Diagnostics

  • TOCE™: Innovative Technology for High Multiplex Real-time PCR | Jong-Yoon Chun, Ph.D.
  • cyclic-CMTA™: An Innovative Concept for Multiplex Quantification | Dae-Hoon Lee, Ph.D.
  • High Multiplex Molecular Diagnostics | In-Taek Hwang, Ph.D.